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本发明提供一种诱导幼苗局部组织膨大建立瞬时表达系统的方法,涉及生物技术领域。该方法包括以下步骤:重组农杆菌:提取大肠杆菌质粒,将启动子连接到质粒,得到重组表达载体,用重组表达载体转化农杆菌,选取阳性转化农杆菌,扩大培养;活化农杆菌:用菌悬浮培养基培养阳性转化农杆菌,得到农杆菌菌液;处理种子:将种子消毒,接种于固体培养基,培养至幼苗局部组织膨大;介导转化:用农杆菌菌液浸泡局部组织膨大的幼苗,转移至共培养基进行培养,诱导农杆菌侵入幼苗局部膨大组织,形成瞬时表达系统。该方法建立的瞬时表达系统有利于简单快速地检验出种子储藏蛋白启动子的活性,降低纯化目标蛋白质的成本。
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本发明公开了一种结晶紫分子印迹微球的合成方法及应用。本发明以结晶紫为模板分子,在乙腈溶剂条件下,以MAA为功能单体,EGDMA或DVB为交联剂,在引发剂作用下,经恒温水浴振荡沉淀聚合法聚合反应,合成得到结晶紫分子印迹聚合物,所述分子印迹微球可有效地吸附结晶紫并具有良好的专一识别性,通过对模板分子的识别与吸附,达到更好的分离富集效果。本发明在整体合成步骤的设计基础上,进一步总结优选的交联剂、搅拌方式、模板分子、功能单体、交联剂、溶剂用量的比例对微球性能的影响,聚合物的吸附容量高达39.12μmol/g,印迹因子为3.17,表明合成制得的聚合物对目标分子具有良好的识别吸附能力,具有优异的应用前景。
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本发明公开了一种用于木薯渣快速降解的复合微生物制剂,包括黑曲霉X2、绿色木霉X10、地衣芽孢杆菌X5和产朊假丝酵母X7,上述四种微生物经单独培养后,按照体积比为4:2:2:2进行复合,复合后得到的复合微生物制剂的有效活菌数为10亿/mL以上,纤维素酶活性为300~550μg/ mL,蛋白酶活性为100~150μg/ mL,pH为6.8~7.0;复合微生物制剂按照占木薯渣重量0.3~0.5%的添加量与粒度为3~5cm的木薯渣进行堆肥;本发明还提供该复合微生物制剂的制备方法与应用。本发明复合微生物制剂7~10天可使木薯渣腐烂,纤维素类物质降解率为85%以上,蛋白类物质降解率为90%以上。
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本发明公开了一种低氨基甲酸乙酯客家娘酒及其生产方法。该方法先将糯米用清水浸泡;将浸泡后的糯米用蒸汽蒸煮至饭粒不呈白心;冷却;再加入相当于糯米重量2‰-5‰的麦曲,3%-8%的红曲,2‰-5‰的酒曲;拌匀,入缸;在32-38℃温度条件下进行前发酵,加入乳酸菌,混匀;密封发酵两天;加入40-50度白酒进行后发酵。一个月后取出,调整pH,加入酸性脲酶处理48-60h后,再次加入酸性脲酶,搅拌处理48-60h,最后经过澄清、煎酒、陈酿、勾兑、杀菌、过滤即得客家娘酒成品。本发明的低氨基甲酸乙酯客家娘酒红褐色晶莹剔透,酒体甘醇,香气浓郁,鲜甜爽口,余味绵长,饮用安全性高。
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本发明公开了一种检测花生黑腐病菌的LAMP引物组及其快速检测方法和试剂盒。所述LAMP引物组包括一对外引物F3/B3和一对内引物FIP/BIP;其核苷酸序列分别依次如SEQ ID NO.2~SEQ ID NO.5所示。本发明提供的LAMP引物组合可用于花生黑腐病菌的快速检测,且本发明提供的检测方法成本低、操作简单、实用性好,不需要昂贵的仪器设备,仅需要一台可控温的水浴锅即可完成反应;反应结果易判断,且检测灵敏度高、特异性强,具有较大的应用前景。
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本发明公开了一种从酿造酱渣中快速制取粗脂肪的方法,包含以下步骤:1)将酱渣装入压榨机,进行预压;2)将酱渣装入流化床,进行流化干燥,得到干酱渣;3)将干酱渣装入萃取釜中,通入萃取溶剂,进行亚临界萃取,萃取完后,减压蒸发,得到酱渣粗脂肪,粕中的溶剂减压汽化去除,汽化后的萃取溶剂经压缩、冷凝液化后,回到溶剂储罐循环使用。本发明的方法具有干燥时间短,萃取效率高,粗脂肪几乎不被氧化,粕中粗脂肪的残留低于2%,萃取溶剂从粗脂肪和粕中脱除、回收容易,无溶剂残留等优点。且工艺简单,操作步骤少,成本低,单位时间、单位设备容积内处理量大,适宜于进行大批量处理。得到的粗脂肪质量好,稍加精炼便可使用。
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本发明公开了一种含喜树碱植物水培根系化感物质的分离富集和检测方法。首先以硅胶作填充剂填充固相萃取柱对植物水培液进行萃取吸附根系代谢物,然后取出填充硅胶加到硅胶层析柱上层进行柱层析分离,再以石油醚、乙酸乙酯、乙醇、氯仿作洗脱剂,以不同组合配比进行洗脱,按洗脱液组分收集洗脱液,旋蒸浓缩,利用气质联用(GC‑MS)技术对分离组分进行分析。本发明实现了两种植物水培根系分泌物中化感物质的大量分离富集和检测。结果从喜树水培根系和蛇根草水培根系分泌物中共分离得到25种化感物质。本发明对探明更多的水培体系中的化感物质具有非常重要的技术指导作用,基于本发明将可以实现对化感物质中有自毒作用的物质及时进行清除,保证植物的生长不会被抑制,促使植物旺盛生长,对优化植物水培体系具有重要意义。
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本发明涉及一种利用纳米竹炭强化功能微生物降解石油组分的方法及应用,所述功能微生物为鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)GY2B,所述石油组分包括多环芳烃(菲)和原油,在添加50‑200mg/L纳米竹炭的情况下,可显著提高功能菌株GY2B对水中石油组分的降解能力,用海藻酸钠包埋法将纳米竹炭与功能微生物GY2B进行固定化后可应用于含石油组分废水的生物处理和石油污染水体的生物修复。
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本发明涉及涉及生物技术和分子生物学领域,更具体地,涉及一种α‑半乳糖苷酶及克隆表达方法。该方法包括利用解淀粉乳杆菌L6获取α‑半乳糖苷酶基因;将所述α‑半乳糖苷酶基因及表达载体进行酶切、连接以及转化;将所述转化后的重组质粒进行筛选;利用诱导剂将所述筛选后的重组质粒进行诱导表达。本申请首次对来自解淀粉乳杆菌的α‑Gal在大肠杆菌BL21中进行克隆表达,通过亲和层析的方法可以大量制备比较纯的酶液,具有较强的水解α‑半乳糖苷键的活性。
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本发明公开了一株具有生防及诱导抗病作用的拟康宁木霉Tk905菌株及其应用,所述拟康宁木霉Tk905菌株于2021年9月14日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,菌种保藏号为GDMCC No:61934。本发明研究显示,拟康宁木霉Tk905菌株及其发酵液对多种植物病原真菌生长均具有较明显抑制作用,且在后期能覆盖多种病原真菌,并在周围产生大量的分生孢子,表现出极强的竞争力及广谱抗植物病原真菌活性,同时拟康宁木霉Tk905菌株还可以诱导植物产生抗病性,具有巨大的生防潜力,具有较大的开发应用前景。
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本发明公开了一种快速检测小鹅瘟病毒的LF‑RPA可视化试剂盒及其应用,该试剂盒包括一套引物组和核酸检测试纸条,该试剂盒的使用方法如下:首先配制LF‑RPA反应体系,LF‑RPA反应体系包含水、反应缓冲液、GPV上游引物、GPV下游引物、LF Probe、醋酸镁、RPA聚合酶以及待测样品DNA;然后将配好的RPA反应体系置于37℃温度反应10min;把反应后的LF‑RPA反应体系通过一次性核酸检测装置检测后进行结果判读,结果判断为:若核酸检测试纸条出现两条红色条带,一条位于质控区(C线),一条位于检测区(T线),则结果为阳性;若核酸检测试纸条仅在质控区有一条色条带,则结果为阴性。该试剂盒在常温下即可进行反应,操作简单,反应快速,结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。
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本发明公开一种防治橡胶榕白绢病的链霉菌,其命名为链霉菌(Streptomycetes spectabilis)AY‑12,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏日:2019年9月4日,保藏编号为GDMCC NO:60759。本发明从土壤中分离筛选出链霉菌(Streptomycetes spectabilis)AY‑12,对橡胶榕白绢病具有防治作用,对多种病原菌具有拮坑作用,对橡胶榕白绢病的防治具有重要意义,对生态环境影响小。